(Aliran sitometri, FCM) adalah penganalisis sel yang mengukur intensiti pendarfluor penanda sel yang berwarna. Ia adalah teknologi berteknologi tinggi yang dibangunkan berdasarkan analisis dan penyortiran sel tunggal. Ia dapat dengan cepat mengukur dan mengklasifikasikan saiz, struktur dalaman, DNA, RNA, protein, antigen dan sifat fizikal atau kimia lain sel, dan boleh berdasarkan pengumpulan klasifikasi ini.
Cytometer aliran terutamanya terdiri daripada lima bahagian berikut:
1 ruang aliran dan sistem fluidics
2 sumber cahaya laser dan sistem pembentukan rasuk
3 sistem optik
4 sistem elektronik, penyimpanan, paparan dan analisis
Sistem penyortiran sel 5
Antaranya, pengujaan laser dalam sumber cahaya laser dan sistem pembentukan rasuk adalah pengukuran utama isyarat pendarfluor dalam sitometri aliran. Keamatan cahaya pengujaan dan masa pendedahan berkaitan dengan intensiti isyarat pendarfluor. Laser adalah sumber cahaya yang koheren yang dapat memberikan panjang gelombang tunggal, intensiti tinggi, dan pencahayaan yang tinggi. Ia adalah sumber cahaya pengujaan yang ideal untuk memenuhi keperluan ini.
Terdapat dua kanta silinder antara sumber laser dan ruang aliran. Kanta ini menumpukan rasuk laser dengan keratan rentas bulat yang dipancarkan dari sumber laser ke dalam rasuk elips dengan keratan rentas yang lebih kecil (22 μm × 66 μm). Tenaga laser dalam rasuk elips ini diedarkan mengikut taburan normal, memastikan keamatan pencahayaan yang konsisten untuk sel -sel yang melalui kawasan pengesanan laser. Sebaliknya, sistem optik terdiri daripada pelbagai set kanta, lubang pin, dan penapis, yang boleh dibahagikan kepada dua kumpulan: hulu dan hiliran ruang aliran.
Sistem optik di hadapan ruang aliran terdiri daripada lensa dan lubang pin. Fungsi utama kanta dan lubang pin (biasanya dua kanta dan lubang pin) adalah untuk memfokuskan rasuk laser dengan keratan rentas bulat yang dipancarkan oleh sumber laser ke dalam rasuk elips dengan keratan rentas yang lebih kecil. Ini mengedarkan tenaga laser mengikut taburan normal, memastikan keamatan pencahayaan yang konsisten untuk sel -sel di seluruh kawasan pengesanan laser dan meminimumkan gangguan dari cahaya sesat.
Terdapat tiga jenis penapis utama:
1: Penapis Pas Long (LPF) - Hanya membenarkan cahaya dengan panjang gelombang lebih tinggi daripada nilai tertentu untuk dilalui.
2: Penapis Lulus Pendek (SPF) - Hanya membenarkan cahaya dengan panjang gelombang di bawah nilai tertentu untuk dilalui.
3: Penapis Bandpass (BPF) - Hanya membenarkan cahaya dalam julat panjang gelombang tertentu untuk dilalui.
Kombinasi penapis yang berbeza boleh mengarahkan isyarat pendarfluor pada panjang gelombang yang berbeza kepada tiub fotomultiplier individu (PMT). Sebagai contoh, penapis untuk mengesan pendarfluor hijau (FITC) di hadapan PMT ialah LPF550 dan BPF525. Penapis yang digunakan untuk mengesan pendarfluor oren-merah (PE) di hadapan PMT adalah LPF600 dan BPF575. Penapis untuk mengesan pendarfluor merah (CY5) di hadapan PMT adalah LPF650 dan BPF675.
Cytometry aliran digunakan terutamanya untuk penyortiran sel. Dengan kemajuan teknologi komputer, perkembangan imunologi dan penciptaan teknologi antibodi monoklonal, aplikasinya dalam biologi, perubatan, farmasi dan bidang lain menjadi semakin meluas. Aplikasi ini termasuk analisis dinamik sel, apoptosis sel, menaip sel, diagnosis tumor, analisis keberkesanan dadah, dll.
Masa Post: Sep-21-2023
