(Flow cytometry, FCM ) ialah penganalisis sel yang mengukur keamatan pendarfluor penanda sel berwarna. Ia adalah teknologi berteknologi tinggi yang dibangunkan berdasarkan analisis dan pengasingan sel tunggal. Ia boleh mengukur dan mengklasifikasikan saiz, struktur dalaman, DNA, RNA, protein, antigen dan sifat fizikal atau kimia sel yang lain dengan pantas, dan boleh berdasarkan pengumpulan klasifikasi ini.
Sitometer aliran terutamanya terdiri daripada lima bahagian berikut:
1 Ruang aliran dan sistem bendalir
2 Sumber cahaya laser dan sistem pembentuk pancaran
3 Sistem optik
4 Elektronik, storan, paparan dan sistem analisis
5 Sistem pengisihan sel
Antaranya, pengujaan laser dalam sumber cahaya laser dan sistem pembentukan rasuk adalah ukuran utama isyarat pendarfluor dalam sitometri aliran. Keamatan cahaya pengujaan dan masa pendedahan berkaitan dengan keamatan isyarat pendarfluor. Laser ialah sumber cahaya koheren yang boleh memberikan pencahayaan panjang gelombang tunggal, intensiti tinggi dan kestabilan tinggi. Ia adalah sumber cahaya pengujaan yang ideal untuk memenuhi keperluan ini.
Terdapat dua kanta silinder antara sumber laser dan ruang aliran. Kanta ini memfokuskan pancaran laser dengan keratan rentas bulat yang dipancarkan daripada sumber laser ke dalam pancaran elips dengan keratan rentas yang lebih kecil (22 μm × 66 μm). Tenaga laser dalam pancaran elips ini diagihkan mengikut taburan normal, memastikan intensiti pencahayaan yang konsisten untuk sel yang melalui kawasan pengesanan laser. Sebaliknya, sistem optik terdiri daripada beberapa set kanta, lubang jarum, dan penapis, yang boleh dibahagikan secara kasar kepada dua kumpulan: hulu dan hilir ruang aliran.
Sistem optik di hadapan ruang aliran terdiri daripada kanta dan lubang jarum. Fungsi utama kanta dan lubang jarum (biasanya dua kanta dan lubang jarum) adalah untuk memfokuskan sinar laser dengan keratan rentas bulat yang dipancarkan oleh sumber laser ke dalam rasuk elips dengan keratan rentas yang lebih kecil. Ini mengagihkan tenaga laser mengikut taburan normal, memastikan keamatan pencahayaan yang konsisten untuk sel merentasi kawasan pengesanan laser dan meminimumkan gangguan daripada cahaya sesat.
Terdapat tiga jenis penapis utama:
1: Penapis laluan panjang (LPF) - hanya membenarkan cahaya dengan panjang gelombang lebih tinggi daripada nilai tertentu untuk melaluinya.
2: Penapis laluan pendek (SPF) - hanya membenarkan cahaya dengan panjang gelombang di bawah nilai tertentu melaluinya.
3: Penapis laluan jalur (BPF) - hanya membenarkan cahaya dalam julat panjang gelombang tertentu melaluinya.
Kombinasi penapis yang berbeza boleh mengarahkan isyarat pendarfluor pada panjang gelombang yang berbeza ke tiub photomultiplier individu (PMT). Sebagai contoh, penapis untuk mengesan pendarfluor hijau (FITC) di hadapan PMT ialah LPF550 dan BPF525. Penapis yang digunakan untuk mengesan pendarfluor oren-merah (PE) di hadapan PMT ialah LPF600 dan BPF575. Penapis untuk mengesan pendarfluor merah (CY5) di hadapan PMT ialah LPF650 dan BPF675.
Sitometri aliran digunakan terutamanya untuk pengisihan sel. Dengan kemajuan teknologi komputer, pembangunan imunologi dan penciptaan teknologi antibodi monoklonal, aplikasinya dalam biologi, perubatan, farmasi dan bidang lain menjadi semakin meluas. Aplikasi ini termasuk analisis dinamik sel, apoptosis sel, penaipan sel, diagnosis tumor, analisis keberkesanan ubat, dsb.
Masa siaran: Sep-21-2023
